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Para múltiplas cópias de moléculas de DNA, a temperatura de desnaturação é definida como a temperatura na qual metade das cadeias de ADN estão no estado de dupla hélice e a outras metade estados de "random coils". A temperatura de desnaturação depende do comprimento da molécula e da composição específica da sequência de nucleotídeos.
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A altas temperaturas ou pH extremos o DNA sofre desnaturação,isto porque ocorre ruptura das pontes de hidrogênio entre os pares de bases.Esta desnaturação faz com que diminua a viscosidade da solução de DNA. Durante a desnaturação nenhuma ligação covalente é desfeita, ficando as duas fitas de DNA separadas
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