• Matéria: Biologia
  • Autor: dorademoraes
  • Perguntado 7 anos atrás

Você precisa isolar mitocôndrias de células do fígado de camundongos para estudar a relação retículo endoplasmático e mitocôndria e seu papel no estabelecimento de um quadro de obesidade. Proponha um protocolo de isolamento das mitocôndrias a partir de hepatócitos obtidos de tecidos de camundongos.

Respostas

respondido por: vanessafonntoura
0

Olá!

Para isolar com sucesso mitocôndrias que utilizam este protocolo é fundamental para manter todas as soluções e amostras de tecido em gelo para preservar a viabilidade mitocondrial.

As mitocôndrias irão exibir uma diminuição na atividade funcional, mesmo se mantidas em gelo, ao longo do tempo.

Anestesiados com éter e eutanasiados, expondo o fígado mediante incisão bilateral na cavidade abdominal, com remoção imediata.

  • Picotado em pequenos  fragmentos
  • Imersos rapidamente em 50 mL de meio contendo sacarose 250 mM,
  • Homogeneizadas,
  • Centrifugada,
  • Sobrenadante resultante.
  • Ressuspenso em 10 mL de meio contendo sacarose 250 mM.

Espero ter ajudado.

Perguntas similares