Que procedimento experimental é realizado nas análises de Southern blot, Northern blot e Western blot? E qual é a principal diferença entre as análises dessas técnicas?
Respostas
A análise Southern blot permite detectar a presença de uma sequência específica de ADN numa mistura complexa deste ácido nucleico. Para isso, utiliza a técnica de eletroforese em gel de agarose para separar os fragmentos de DNA de acordo com seu comprimento e, posteriormente, a transferência para uma membrana na qual ocorre a hibridização da sonda.
A análise Northern blot é usado para detectar uma sequência específica de RNA em uma amostra de sangue ou tecido, que é submetido a uma electroforese em gel para separar os fragmentos de acordo com o seu tamanho. Depois disso, é transferido para uma membrana carregada positivamente, na qual a hibridação de uma sonda molecular radioativa ou quimicamente marcada é realizada.
Enquantro que, a analise Western blot identifica proteínas específicas em uma mistura complexa de proteínas, como a encontrada em extratos de células ou tecidos. A técnica utiliza três etapas: a separação por tamanho, transferência para um suporte sólido e a visualização por marcação de proteínas com o uso de anticorpos.