Question

Vamos imaginar uma situação em que você atue como responsável pela extração de material genético no setor de biologia molecular em um Laboratório de Análises Clínicas. Chega uma amostra de soro de um paciente com suspeita de chikungunya e você extraiu o RNA utilizando um kit comercial. Posteriormente você faz a síntese da molécula de cDNA a partir do RNA e amplifica o DNA por PCR convencional.



Sobre as etapas de amplificação do material genético por PCR, analise as seguintes afirmativas:



I. Na primeira etapa, o DNA é desnaturado por aquecimento entre 92-95˚C por cerca de 30 minutos, sem risco de degradação do material genético.

II. Na segunda etapa, ocorre o anelamento da enzima DNA polimerase específica para o fragmento de material genético que deseja-se amplificar, através do aquecimento entre 50-60 ˚C por cerca de 30 segundos.
III. Na terceira etapa, a enzima DNA polimerase atua adicionando nucleotídeos de acordo com o fragmento que deseja-se amplificar, duplicando o material genético, através do aquecimento entre 70-72 ˚C por 1,5 minutos.

IV. Na primeira etapa, o DNA é desnaturado por aquecimento entre 92-95˚C por cerca de 15 segundos, para quebrar as pondes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas e permitir a abertura da dupla fita.

V. Na segunda etapa, ocorre o anelamento dos iniciadores ou primers específicos para o fragmento de material genético que deseja-se amplificar, através do aquecimento entre 50-60 ˚C por cerca de 30 segundos.

VI. Na terceira etapa, a enzima DNA ligase permite a ligação fosfodiéster entre os nucleotídeos de acordo com o fragmento que deseja-se amplificar, através do aquecimento entre 70-72 ˚C por 1,5 minutos.

VII. Um ciclo de amplificação por PCR é suficiente para a amplificação do fragmento de PCR desejado.

Assinale a alternativa que apresenta a resposta correta:

Answer 1

a. Apenas as alternativas III, IV e V estão corretas.

Answer 2

VERIFICADO AVA:

a. Apenas as alternativas III, IV e V estão corretas.